Dag 1
Dag 1 har gått ut på att rena ut plasmid DNA ur e. coli bakterier. Detta utfördes genom att först lysera bakterierna för att få plasmiderna fria och sedan rensa bort celldebris och genomiskt DNA ur lösningen via centrifugering.
Sedan rensades RNA och mindre föroreningar bort med hjälp av ett silicamembran som fångar upp plasmiderna men släpper igenom mindre RNA och DNA sekvenser.
Resultatet från reningen kontrollerades sedan med hjälp av spektofotometri. Detta skedde genom mätning av absorbans vid 260nm och 280nm. Mätningen vid 260nm visar vår koncenration av plasmiderna och att ta kvoten ur a260/a280 kan man se eventuella proteinföroreningar. Ett resultat mellan 1,8 och 1,9 visar på ett rent prov, och då vårt resultat låg på 1,81 var plasmidlösningen troligtvis ren.
Hej Petra !
SvaraRaderaHur mycket koncentration fick ni ?
Den här kommentaren har tagits bort av skribenten.
SvaraRaderaHej Petra!
SvaraRaderaHur menar du när du skriver att er plasmid troligtvis är ren? För att påstå det bör man väl ha kontrollerat alla föroreningar? Det kanske vi får se på resultatet från dag 2!
En liten detalj; jag tycker att man renar plasmid och rensar fisk och bär. ;)
Märit